集中空调送风中β-溶血性链球菌检验方法(规范性附录F)
内容来自长沙亚欣电器
F.1 总则
本附录规定了用培养法测定集中空调系统送风中的β一溶血性链球菌。
F.2 术语和定义
下列术语和定义适用于本方法。
F.2.1
β一溶血性链球菌 β-hemolytic streptococcus
集中空调系统送风中采集的样品,经35℃~37℃、24 h~48 h培养,在血琼脂平板上形成的典型菌落。
F.3 仪器和设备
F.3.1 六级筛孔撞击式微生物采样器。
F.3.2 高压蒸汽灭菌器。
F.3.3 恒温培养箱。
F.3.4 平皿:Φ90 mm。
F.4 培养基
F.4.1 血琼脂平板成分:
蛋白胨 10 g
氯化钠 5g
琼脂 20 g
脱纤维羊血 5 mL~10 mL
蒸馏水 1000 mL
F.4.2制法:将蛋白胨、氯化钠、肉膏加热溶化于蒸馏水中,校正pH为7.4~7.6,加入琼脂,121℃20 min灭菌。待冷却至50℃左右,以无菌操作加入脱纤维羊血,摇匀倾皿。
F.5 采样
F.5.1 采样点:每套空调系统选择3个~5个送风口进行检测.每个风口设置1个检测点,一般设在送风口下方15 cm~20 cm、水平方向向外50 cm~100 cm处。
F.5.2采样环境条件:采样时集中空凋系统必须在正常运转条件下.并关闭门窗15 min~30 min以上,尽量减少人员活动幅度与频率.记录室内人员数量、温湿度与天气状况等,
F.5.3 采样方法:以无菌操作,使用撞击式微生物采样器(D.3.1)以28.3 L/min流量采集5 min-15 min。
F.6 检验步骤
F.6.1 培养方法:采样后的血琼脂平板在35℃~37℃下培养24 h~48 h。
F.6.2 结果观察:培养后,在血琼脂平板上形成呈灰白色、表面突起、直径0.5 mm~0.7 mm的细小菌落,菌落透明或半透明,表面光滑有乳光;镜检为革蓝氏阳性无芽孢球菌,圆形或卵圆形,呈链状排列,受培养与操作条件影响链的长度在4个~8个细胞至几十个细胞之间;菌落周围有明显的2 mm~4 mm界限分明、完全透明的无色溶血环。符合上述特征的菌落为β溶血性链球菌:
F.7 结果报告
F.7.1 送风口β一溶血性链球菌测定结果:菌落计数,记录结果并按稀释比与采气体积换算成CFU/m3(空气中菌落形成单位每立方米)。
F.7.2 集中空调系统送风中β一溶血性链球菌测定结果:一个系统送风中β一溶血性链球菌的测定结果按该系统全部检测的送风口β一溶血性链球菌测定值中的最大值给出。